渐渐习惯了现代生活的美国队长史蒂夫·罗杰斯（克里斯·埃文斯暂无内容Chris暂无内容Evans暂无内容饰），在一次行动后隐隐嗅到神盾局内部所弥漫出来的凶险气味。而当得知神盾局正秘密进行的“洞察计划”后，他更为此感到愤怒。某天，神盾局指挥官尼克-法瑞（塞缪尔·杰克逊暂无内容Samuel暂无内容L.暂无内容Jackson暂无内容饰）遭到一群武装分子袭击，他拼尽全力将一支U盘交到美国队长手中，这里面藏着该局二战以来最重要且最可怕的秘密。在此之后，美国队长因涉嫌杀害尼克而遭到前局长亚历山大·皮尔斯（罗伯特·雷德福/Robert暂无内容Redford暂无内容饰）的通缉和追杀，逃亡中他得到黑寡妇（斯嘉丽·约翰逊暂无内容Scarlett暂无内容Johansson暂无内容饰）和退伍老兵“猎鹰”（安东尼·麦凯暂无内容Anthony暂无内容Mackie暂无内容饰）的帮助。
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